蛋白質是鑒定飼料質量時必測的常規營養指標。目前飼料廠普遍采用的標準方法其實質仍是凱氏定氮法，但是由于粗蛋白質測定過程相對較復雜（測定約需3～5小時），很多飼料企業在實際檢測過程中當出現結果異常時不知道如何去分析;有些操作過程不嚴密，導致檢測結果不準確，給生產企業造成損失。筆者根據自己的實踐經驗，總結飼料粗蛋白質測定準確度應注意的一些事項。
     1凱氏定氮法的基本原理

     樣品在催化劑的存在下，用硫酸消煮分解，使蛋白質及其他化合物中的氮轉化為硫酸銨，硫酸銨在濃堿的作用下放出氨氣，通過蒸餾，氨氣隨汽水順著冷凝管流入硼酸溶液，與之結合成為四硼酸銨，用鹽酸標準溶液滴定，即可測定放出的氨氮量。根據氮量，乘以特定系數，一般為6.25（飼料中蛋白質平均含氮量為16%），即可得出樣品中粗蛋白質含量。

     2操作過程中應注意的事項

     2.1消化時應在凱氏瓶中加幾粒玻璃珠，以防消化時硫酸暴沸液體濺失，并在凱氏瓶口上蓋一小漏斗使蒸汽凝結回流，這樣會使消化完全。

     2.2開始消化要用小火，待樣品焦化，泡沫消失后，逐步緩慢加強火力，消化過程中經常轉動凱氏瓶，將濺到瓶壁上的黑渣全部浸入凱氏燒瓶底部的硫酸溶液內，以避免消化不完全。消化時要控制好溫度，380℃較好，過低消化時間長，且不完全;過高會引起氮的損失。由于電爐不好控制溫度，最好使用可調電爐或功率為800w的電爐。

     2.3消化液達到透明并非表明樣品已經消化完全，為防止測定結果偏低，需要進一步加熱補充消化至少2小時。

     2.4在樣品停止加熱后，如冷卻時間過長易引起硫酸樣液凝結不易溶解（尤其冬天季節），故應冷卻至不燙手時加入少量蒸餾水（約20mL），搖動凱氏瓶，轉移到容量瓶中，冷卻，定容。但要注意水與熱硫酸的劇烈反應，以免凱氏瓶破裂。

     2.5樣液加入蒸餾裝置后，應先用棒狀玻璃塞封口，并加水密封，防止漏氣。然后再加入堿液，這個順序不能弄錯，否則會造成測定結果偏低。同時要注意堿液要緩慢加入，不可太快。

     2.6滴定用的鹽酸標準滴定溶液必須準確，使用前應將溶劑瓶上下搖動幾次，保證溶液濃度均勻一致。滴定時注意排空滴定管底部的氣泡，確保滴定結果準確。
 摘自：河南畜牧獸醫

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