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              如何測定櫻桃中葉綠素含量

              來源: 本站  類別:實用技術  更新時間:2010-12-29  閱讀
              【本資訊由中國糧油儀器網提供】

              如何測定櫻桃中葉綠素含量

              葉綠素是光合作用最重要的產物,同時葉綠素的含量也是植物重要的生理指標之一。因此,對櫻桃葉綠素提取方法的研究意義重大。早期葉綠素測定廣泛采用Arnon法,該方法由于先研磨后除渣,工作量大,步驟多,且容易受光氧化而引起偏差,不適宜田間大量樣品的提取和測定。陳福明和張憲政等分別對丙酮、乙醇和水不同配比混合液浸提效果進行了深入的研究,得出適宜提取葉片葉綠素的混合液。洪法水等研究認為,用丙酮和乙醇的混合液提取植物葉片葉綠素比單一提取液效果要好。而徐邦發等為解決通常采用分光光度計費工耗時、易引起離體葉綠素的光分解而造成誤差等問題,另外還有現在很通用的葉綠素測定儀法。葉綠素測定儀是通過將葉片夾入儀器頭部,然后按下頭部就可以得到葉片葉綠素含量。非常方便。葉綠素測定儀有時也被叫做葉綠素含量儀,SPAD502就是一款最為典型同時也是測定最為方便的葉綠素測定儀。通過比較幾種不同混合提取液的提取,提出測定棉花葉片葉綠素含量的丙酮溶液浸提法,該法具有準確、簡單易行的優點。

              實驗過程:試驗試劑:乙醇、丙酮、正丁醇(均為分析純)、石英砂。試驗儀器與器皿:千分之一電子分析天平、紫外可見分光光度計、剪刀、研缽、移液管、漏斗、大試管。提取液:80%的丙酮、95%的乙醇、正丁醇、80%的丙酮和95%乙醇的5種混合液(配置比例分別為3∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶3)8個處理。在栽培的“龍田晚紅”櫻桃樹中選取有代表性的葉片20片,將其洗凈、吸干、去大葉脈,之后稱取0.1g葉片加入5mL丙酮和少量的石英砂在研缽中進行研磨,勻漿后過濾(用80%丙酮清洗研缽及殘渣,合并濾液),濾液用不同的有機試劑定容至10 mL,放入棕色瓶中,再分別加入各種提取液10 mL,放在避光處浸泡葉片24 h,重復3次。用1∶1的80%丙酮和95%乙醇混合液,從2 h開始,每隔2 h用紫外可見分光光度計進行比色,分別在波長為645,663 nm下進行光密度值測定。根據Lamber-Beer定律,葉綠素a、葉綠素b與不同波長下光密度值之間的關系式如下。葉綠素a的含量(mg/g)=(12.71A663-2.59A645)V/W×1000;葉綠素b的含量(mg/g)=(22.88A645-4.67A663)V/W×1000;葉綠素的總含量(mg/g)=(20.29A645+8.04A663)V/W×1000;式中,A645,A663分別為相應波長下的光密度值,V為提取液的體積,W為葉片質量。

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